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流式JC-1檢測實驗服務(wù)
簡要描述:
流式JC-1檢測實驗服務(wù)是指線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的電位差,它是細胞能量代謝的關(guān)鍵指標之一。JC1是一種常用的線粒體膜電位檢測染料,其原理是基于JC1 在不同濃度下呈現(xiàn)出不同的熒光顏色。JC1 有單體和多聚體兩種存在狀態(tài)。在低濃度時,JC1 以單體存在,此時可以檢測到綠色熒光。
更新時間:2024-07-26
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廠商性質(zhì):其他
JC-1線粒體膜電位熒光探針染色步驟(流式細胞儀法):
1. 于6-,12或24-孔板上進行細胞鋪板,密度為5×105 cells/mL。37℃,5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。選擇合適的化合物根據(jù)特定的步驟進行凋亡誘導(dǎo)。 注:進行凋亡誘導(dǎo)時的細胞密度建議不超過1×106 cells/mL,也可根據(jù)自己的細胞類型培養(yǎng)至合適的密度。
2. 取0.5 mL細胞懸液至無菌的離心管內(nèi);
3. 室溫條件400 x g離心5 min;吸掉上清。
4. 用0.5 mL JC-1工作液重懸細胞,于37℃,5%CO2培養(yǎng)箱孵育15-30 min;注意:一般情況,15 min足以進行充分的染色。
5. 室溫條件400 x g離心5 min;吸掉上清;
6. 用2 mL細胞培養(yǎng)液或者緩沖液重懸細胞,之后室溫條件400 x g離心5 min;吸掉上清;
7. 重復(fù)步驟6);
8. 用0.5 mL新鮮培養(yǎng)液或者緩沖液重懸細胞,即可進行后續(xù)的流式分析。注意:請馬上進行流式定量分析,此細節(jié)很重要。
數(shù)據(jù)分析:含有紅色JC-1聚集物的健康細胞線粒體用FL2通道檢測;含有綠色JC-1單體的凋亡或不健康細胞用FL1(FITC)通道檢測。
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